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      什么限制了您的文章發(fā)表?組織圖片自發(fā)熒光太亮

      更新時間:2023-12-13   點擊次數(shù):549次

      在免疫組化檢測過程中,許多樣本組織會產(chǎn)生可通過各種波長濾光片的組織內(nèi)源性自發(fā)熒光,干擾抗體標(biāo)記的目的蛋白熒光的觀察,甚至導(dǎo)致實驗失敗。為了解決免疫組化實驗中的自發(fā)熒光,VectorLabs公司專門開發(fā)了一款Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒,該產(chǎn)品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑使用方便,無需稀釋操作,為即用型試劑。 該試劑盒中含有防自發(fā)熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種)??蛻魺o需單獨購買封片劑,經(jīng)濟、實用。

      注意:該試劑盒對脂褐素造成的組織自發(fā)熒光無效。


      ● 試劑盒組成: 

      a. Vector®TrueVIEW™ Reagent A 5ml b. Vector®TrueVIEW™ Reagent B 5ml c. Vector®TrueVIEW™ Reagent C 5ml d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml e. VECTASHIELD Vibrance Antifade  Mounting Media with DAPI 2ml

      其中,貨號SP-8400包含a,b,c,d四個組分;貨號SP-8500包含a,b,c,e四個組分


      ● 產(chǎn)品使用方法:

      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。(注意混合順序,先將A和B以1:1比例混合10s,再加入C,混勻10s) 
      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上,將樣本完-全覆蓋,孵育2-5min 
      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 使用PBS緩沖液洗片5次,除去多余緩沖液,VECTASHIELD Vibrance Media封片后觀察 

      ● 產(chǎn)品特征 

      A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色; B 提高信噪比; C 產(chǎn)品穩(wěn)定,儲存在滴瓶中,使用方便; D 操作簡單,快速;整個染色過程僅需2-5min; E 為使用者提供清晰、明確、真實的染色結(jié)果; F 適用于多種熒光染料的自發(fā)熒光去除,包括Alexa488,Alexa 594,DyLight 488,DyLight 594,F(xiàn)ITC,Cyanine 5和GFP;

      G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高,可對細胞核進行清晰的染色。


      ● 產(chǎn)品對自發(fā)熒光淬滅效果:

      ◆ 右圖為經(jīng)Vector®TrueVIEW™kit處理后,人腎臟組織切片中自發(fā)熒光淬滅的百分比與處理時間之間的關(guān)系。 ◆ Note:2分鐘內(nèi)即可達到最大淬滅效果。 


      ● 產(chǎn)品應(yīng)用舉例:  

      > 案例一

      未經(jīng)任何處理使用Vector®TrueVIEW™處理
      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵
      ◆ 上圖為人脾臟組織染色結(jié)果:使用VectaFluor TM Duet試劑盒(DK-8818)檢測的mouse anti-CD20(red)和rabbit anti-Ki67(green)對人脾組織切片的染色。 ◆ 左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果, ◆ 右圖為使用TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒染色結(jié)果。于未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒處理后,自發(fā)熒光顯著減少。


      > 案例二

      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 ◆ A-D圖為人腎臟切片(石蠟切片)染色結(jié)果,實驗中使用anti-AE1 /AE3抗體對角蛋白進行染色(綠色)?!?nbsp;A圖未經(jīng)處理, ◆ B-D圖經(jīng)TrueVIEW™Quencher Kit處理。自發(fā)熒光明顯減弱。延長曝光時間,陽性信號強度也隨之增強。
      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵 揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵


      > 案例三

      未經(jīng)任何處理使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理

      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵

      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵
      ◆ 上圖為人胰腺組織染色結(jié)果:綠色為insulin的染色。
      ◆ 左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果,
      ◆ 右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI(SP-8500)試劑盒染色結(jié)果。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比,經(jīng)該試劑盒處理后,自發(fā)熒光顯著減少,核染色顯著增強。


      > 案例四

      未經(jīng)處理(內(nèi)源性自發(fā)熒光)  經(jīng)TrueVIEW™Quencher Kit處理
      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵
      Company ACompany BCompany C
      揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發(fā)熒光“輕騎兵
      Copper Sulfate SolutionSodium BorohydrideSudan Black B
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      ● 產(chǎn)品訂購信息 Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit

      產(chǎn)品貨號規(guī)格染色切片數(shù)
      Vector® True VIEW™
      Autofluorescence Quenching Kit
      SP-840015ml100-150
      Vector® True VIEW™
      Autofluorescence Quenching Kit
      SP-850015ml100-150
      VECTOR TrueVIEW  
      Autofluorescence Quenching Kit (3ml)
      SP-84033ml~30
      VECTASHIELD® HardSet™
      Antifade Mounting Medium
      H-140010ml100-150
      VECTASHIELD® HardSet™
      with DPI Antifade Mounting Medium
      H-150010ml100-150




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