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什么限制了您的文章發表?組織圖片自發熒光太亮

更新時間:2023-12-13   點擊次數:723次

在免疫組化檢測過程中,許多樣本組織會產生可通過各種波長濾光片的組織內源性自發熒光,干擾抗體標記的目的蛋白熒光的觀察,甚至導致實驗失敗。為了解決免疫組化實驗中的自發熒光,VectorLabs公司專門開發了一款Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒,該產品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結構造成的自發熒光。該試劑使用方便,無需稀釋操作,為即用型試劑。 該試劑盒中含有防自發熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種)。客戶無需單獨購買封片劑,經濟、實用。

注意:該試劑盒對脂褐素造成的組織自發熒光無效。


● 試劑盒組成: 

a. Vector®TrueVIEW™ Reagent A 5ml b. Vector®TrueVIEW™ Reagent B 5ml c. Vector®TrueVIEW™ Reagent C 5ml d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml e. VECTASHIELD Vibrance Antifade  Mounting Media with DAPI 2ml

其中,貨號SP-8400包含a,b,c,d四個組分;貨號SP-8500包含a,b,c,e四個組分


● 產品使用方法:

揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵 將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。(注意混合順序,先將A和B以1:1比例混合10s,再加入C,混勻10s) 
揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵 將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上,將樣本完-全覆蓋,孵育2-5min 
揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵 使用PBS緩沖液洗片5次,除去多余緩沖液,VECTASHIELD Vibrance Media封片后觀察 

● 產品特征 

A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色; B 提高信噪比; C 產品穩定,儲存在滴瓶中,使用方便; D 操作簡單,快速;整個染色過程僅需2-5min; E 為使用者提供清晰、明確、真實的染色結果; F 適用于多種熒光染料的自發熒光去除,包括Alexa488,Alexa 594,DyLight 488,DyLight 594,FITC,Cyanine 5和GFP;

G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高,可對細胞核進行清晰的染色。


● 產品對自發熒光淬滅效果:

◆ 右圖為經Vector®TrueVIEW™kit處理后,人腎臟組織切片中自發熒光淬滅的百分比與處理時間之間的關系。 ◆ Note:2分鐘內即可達到最大淬滅效果。 


● 產品應用舉例:  

> 案例一

未經任何處理使用Vector®TrueVIEW™處理
揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵
◆ 上圖為人脾臟組織染色結果:使用VectaFluor TM Duet試劑盒(DK-8818)檢測的mouse anti-CD20(red)和rabbit anti-Ki67(green)對人脾組織切片的染色。 ◆ 左圖為未經任何處理的染色結果, ◆ 右圖為使用TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒染色結果。于未經處理的染色結果相比,經TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒處理后,自發熒光顯著減少。


> 案例二

揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵 ◆ A-D圖為人腎臟切片(石蠟切片)染色結果,實驗中使用anti-AE1 /AE3抗體對角蛋白進行染色(綠色)。◆ A圖未經處理, ◆ B-D圖經TrueVIEW™Quencher Kit處理。自發熒光明顯減弱。延長曝光時間,陽性信號強度也隨之增強。
揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵 揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵


> 案例三

未經任何處理使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理

揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵

揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵
◆ 上圖為人胰腺組織染色結果:綠色為insulin的染色。
◆ 左圖為未經任何處理的染色結果,
◆ 右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI(SP-8500)試劑盒染色結果。與未經處理的染色結果相比,經該試劑盒處理后,自發熒光顯著減少,核染色顯著增強。


> 案例四

未經處理(內源性自發熒光)  經TrueVIEW™Quencher Kit處理
揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵揭秘:防止組織自發熒光“輕騎兵
Company ACompany BCompany C
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Copper Sulfate SolutionSodium BorohydrideSudan Black B
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● 產品訂購信息 Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit

產品貨號規格染色切片數
Vector® True VIEW™
Autofluorescence Quenching Kit
SP-840015ml100-150
Vector® True VIEW™
Autofluorescence Quenching Kit
SP-850015ml100-150
VECTOR TrueVIEW  
Autofluorescence Quenching Kit (3ml)
SP-84033ml~30
VECTASHIELD® HardSet™
Antifade Mounting Medium
H-140010ml100-150
VECTASHIELD® HardSet™
with DPI Antifade Mounting Medium
H-150010ml100-150




詳情請聯系Vectorlabs 全國總代理- 欣博盛生物科技

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