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TransIT-mRNA轉染試劑協助活體顱內遞送mRNA藥物

更新時間:2023-02-03   點擊次數:1028次

由于mRNA獨te的生物學優勢受到越來越多的關注,并被用于基因治療領域。湖北省十堰市太和醫院神經外科團隊在研究中篩選了一種安全、高效的轉染試劑,即MIRUS的TransIT-mRNA轉染試劑,該試劑成功實現將合成的mRNA在小鼠大腦進行顱內遞送用于膠質瘤基因治療。該論文發表于2022年3月的《Molecular Therapy》雜志。


團隊實驗的造模結果表明,使用商業化的轉染試劑可以成功地將合成的mRNA遞送至大腦,并且TransIT-mRNA顯示出比in vivo jetPEI試劑盒更好的結果,該模型可用于膠質瘤的精確靶向和個性化基因治療。該團隊通過對比實驗表明用in vivo jetPEI或TransIT-mRNA都可成功表達顱內注射的Luc-mRNA,但是TransIT-mRNA轉染試劑的Luc-mRNA的生物熒光信號顯著高于轉染in vivo jetPEI的Luc-mRNA的信號。用TransIT-mRNA轉染試劑注射Luc-mRNA時,熒光素酶的表達時間(60 h)遠高于用in vivo jetPEI注射Luc-mRNA時(36 h)。


TransIT-mRNA轉染試劑協助活體顱內遞送mRNA藥物抑制膠質母細胞瘤


圖2. 采用普通轉染試劑轉染的合成mRNA在顱內的表達


(A)使用in vivo jetPEI介導的顱內表達顱內注射合成的Luc mRNA,通過使用N/P=6和N/P=8的IVIS進行檢測,時間點為12h、24h、36h和48h。上面部分顯示的是每個時間點具有代表性的圖像,下面部分表示總結。

(B)使用1 μg和2 μg體系的TransIT- mRNA介導的顱內注射合成的Luc mRNA顱內表達,IVIS進行檢測,時間點為12h、24h、36h、48h、60h和72h。上面部分是每個時間點具有代表性的圖像,下面部分是總結。

(C)兩種轉染試劑的轉染效率比較。用1 μg含TransIT- mRNA或in vivo jetPEI溶液的熒光素酶mRNA進行顱內注射。*p < 0.05;** p< 0.01。

(D)使用熒光顯微鏡進行檢測TransIT- mRNA介導的顱內注射合成的RFP mRNA的顱內表達。


在實驗中證實利用TransIT-mRNA轉染試劑進行mRNA在體顱內給藥是安全的。顱內遞送TRAIL-mRNA的方法能夠成功抑制膠質瘤的生長。而且通過對比實驗結果,清楚地表明TransIT-mRNA在協助顱內Luc-mRNA遞送方面優于jetPEI,可能是在in vivo jetPEI的成分含有陽離子聚合物PEI,PEI的強陽離子電荷導致細胞死亡,對比之下,TransIT-mRNA試劑更安全,無毒。所以顱內注射mRNA首xuan TransIT-mRNA轉染試劑。后續的小鼠行為學和血液生物化學的指標也驗證了相關試劑顱內應用于mRNA轉染的生物安全性。另外,相關數據表明TransIT-mRNA轉染試劑不影響被測試對象的代謝。體外合成的熒光素酶mRNA經顱內注射后,經常用的TransIT-mRNA轉染試劑包裹后,在小鼠腦內高度表達。 TransIT-mRNA是shi界上di一個用于轉染 mRNA的體外試劑,同時發現TransIT-mRNA在體內的應用效果也非常好。

 

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