多克隆抗體和單克隆抗體的區別詳解

多克隆抗體和單克隆抗體的區別：

什么是單克隆抗體?

Monoclonal-Antibodies-Icon/單克隆抗體定義:

單克隆抗體是僅與目標抗原某一特定表位結合的單一抗體

單克隆抗體的制備

單克隆抗體制備時首先要將免疫原注射到宿主動物體內，當免疫原誘發宿主產生免疫反應，脾臟就會產生大量不同種類的B-細胞。此時單一的B-細胞被提取出來，與骨髓瘤細胞雜交 （癌癥B-細胞）。

之所以要將B-細胞與骨髓瘤細胞雜交，是因為健康正常的脾細胞無法在細胞培養基無限存活，而與骨髓瘤細胞雜交形成雜交瘤細胞后，該細胞就成為永生化胞株，不斷產生抗體。

單一B-細胞從脾臟中分離，形成雜交瘤細胞后，產生的抗體就是單一抗體，只與目標抗原上某一特定的表位反應。

每一個雜交瘤生產出單一的單克隆抗體，這個雜交瘤就被賦予一個克隆號，以此來方便辨別這個特異的抗體是識別哪一個特定的表位。

B-細胞將單克隆抗體分泌至細胞培養基中，然后提取出來做后續的檢測和純化。

一旦單克隆抗體雜交瘤克隆生成，該克隆就十分穩定，可以重復使用，這就確保了每一批次的抗體是wan全一致的。

雜交瘤也可以被注射到小鼠的腹腔中大量生產，雜交瘤分泌富含抗體的一種液體，被稱作腹水，用注射器抽取，就可獲得大量的單克隆抗體。

單克隆抗體適用于:

檢測單一抗原

檢測蛋白質家族的單一成員

不同實驗/批次的結果穩定一致

細胞染色背景較低-很適用于IHC、ICC、IF等應用

量化蛋白質表達（例：流式或熒光細胞分選）

探測分子結構變化

探測磷酸化狀態變化

為X射線晶體學探測目標

免疫治療

單克隆抗體不建議用于:

根據同源性檢測不同物種的目標蛋白

檢測濃度較低的目標蛋白

檢測形態變化了的蛋白

什么是多克隆抗體?

Polyclonal-Antibodies-Icon/多克隆抗體定義

多克隆抗體是與目標蛋白上多種不同表位結合的多種不同抗體。

多克隆抗體制備

多克隆抗體的第一步和單克隆抗體一樣，都是將免疫原注射到宿主體內產生免疫反應，激活了多種B細胞。不同的是免疫過后，多克隆抗體就直接從免疫宿主的血清中分離出來，或純化，沒有與骨髓瘤細胞融合的過程。一旦宿主動物死亡，需要免疫新的動物，這時血清中的抗體就會有所不同。

根據制備方法的不同，功能自然也就有所不同了。雖然多抗每批次有輕微差別，但是因為它識別的表位多，這個差別影響并不算太大，而單克隆抗體雖然價格偏高，可是特異性更強更穩定。

多克隆抗體適用于:

檢測有高同源性的抗原的已知或未知同種型

檢測濃度較低的抗原

捕獲盡可能多的抗原（例：IP或ChIP）

檢測變性的蛋白

檢測可能發生了糖基化或形態變化的目標蛋白

用多種檢測方法檢測一種原蛋白時

檢測pH和鹽度不同的溶液中的目標蛋白

多克隆抗體不建議用于:

量化檢測，例：流式。由于不同表位的結合導致信號被放大加強，可能會導致結果不準確

當高同源性蛋白的交叉反應會引起問題時

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