細(xì)胞增殖研究中使用alamar Blue的3個(gè)理由

如果您使用增殖細(xì)胞作為研究的一部分，您將知道監(jiān)測其生長速度的重要性。培養(yǎng)中的細(xì)胞以異常速率分裂，可能表明其生長條件出現(xiàn)問題，并可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性，更不用說留給您的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞太少了。

除了監(jiān)測培養(yǎng)中的細(xì)胞生長外，許多實(shí)驗(yàn)還旨在比較以不同方式處理的細(xì)胞群的增殖或健康狀況。例如，您可能想知道通過比較處理和未處理細(xì)胞的增殖來了解新候選藥物對細(xì)胞分裂速率的影響。這些實(shí)驗(yàn)是如此常規(guī)，因此擁有一種每次都可以使用的簡單、可靠的方法非常重要。訪問科學(xué)文檔、方案、故障排除建議和其他資源對于確保您從所選方法中獲得最佳效果也至關(guān)重要。值得慶幸的是，有各種各樣的工具和技術(shù)可用于跟蹤細(xì)胞生長，蕞hao的細(xì)胞增殖體外檢測器之一是 alamarBlue。我們將解釋了什么是 alamarBlue 以及它是如何工作的，然后探討了這種試劑的三個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)。我們還將向您介紹有用的資源，以支持您使用 alamarBlue 的學(xué)習(xí)。

什么是 alamarBlue？

alamarBlue 含有細(xì)胞滲透性，無毒的 REDOX 指示染料刃天青。響應(yīng)細(xì)胞代謝，染料的顏色從弱熒光藍(lán)色變?yōu)閺?qiáng)熒光粉紅色（圖 1）。粉紅色熒光的強(qiáng)度與活的呼吸細(xì)胞的數(shù)量成正比; 因此，AlamarBlue 是細(xì)胞健康的直接指標(biāo)。

為何建議您使用 alamarBlue 進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測呢?

優(yōu)勢一：alamarBlue 無毒

與其他增殖試劑相比，alamarBlue 不會干擾電子傳遞鏈或影響細(xì)胞呼吸或功能，因此無毒且使用安全（O'Brien 等人，2000）。這也意味著 alamarBlue 可能比有毒化合物更容易獲得，用于教學(xué)實(shí)驗(yàn)室和項(xiàng)目學(xué)生的實(shí)驗(yàn)室。與有毒增殖劑不同，暴露于 alamarBlue 的細(xì)胞保持功能齊全，存活和健康，不受指示劑存在的影響。結(jié)合您不需要裂解細(xì)胞來測量 alamarBlue 活性的事實(shí)，您可以在測量增殖后保持細(xì)胞生長，并在以后的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行重復(fù)測量。這使得 alamarBlue 適合長期的時(shí)間課程研究。

優(yōu)勢 2：alamarBlue 使用簡單

alamarBlue 的工作流程很簡單：將試劑添加到細(xì)胞中，孵育并測量（圖 2）。作為一種高度信任和引用的化合物，許多實(shí)用的建議、方案和已發(fā)表的實(shí)驗(yàn)可以為您提供支持。alamarBlue 與多種培養(yǎng)基兼容，因此在添加 alamarBlue 之前，您不需要更換細(xì)胞培養(yǎng)基。哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下與 alamarBlue 一起孵育至少 1-4 小時(shí)：在 37°C 和 pH 6.8 至 7.4 之間。作為細(xì)胞增殖讀數(shù)的顏色變化可以使用熒光或吸光度進(jìn)行測量，以蕞適合您的實(shí)驗(yàn)室為準(zhǔn)。在 570nm 和600nm 處監(jiān)測吸光度，在 530-560nm 激發(fā)波長和 590nm 發(fā)射波長處監(jiān)測熒光。然后，您可以使用簡單的 alamarBlue 計(jì)算器來處理數(shù)字并指示細(xì)胞在時(shí)間范圍內(nèi)生長的速度。

優(yōu)勢 3：alamarBlue 靈活

alamarBlue 的靈活性是它被廣泛使用并作為增殖劑受到如此高度信任的另一個(gè)主要原因（它在PubMed 上有超過 3，000 次引用）。訂購一種試劑并將其用于各種實(shí)驗(yàn)總是更容易，而不是在方案之間來回切換。

除了培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞外，alamarBlue 還適用于其他細(xì)胞類型，包括細(xì)菌，酵母，真菌和原生動(dòng)物，并且與貼壁或懸浮細(xì)胞兼容。alamarBlue 也可用于細(xì)胞計(jì)數(shù)低的實(shí)驗(yàn)，能夠檢測培養(yǎng)物中少至 50 個(gè)細(xì)胞！它適合與酚紅一起使用，它只是稍微改變了測量值。alamarBlue 是廣泛應(yīng)用的不錯(cuò)選擇，包括細(xì)胞增殖測定、相對細(xì)胞毒性生物測定和細(xì)胞因子測定。

alamarBlue 的靈活性延伸到實(shí)用優(yōu)勢。由于 alamarBlue 是水溶性的，因此不需要洗滌/固定或提取步驟。如果在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的當(dāng)天無法讀取板，您可以將它們冷藏在塑料或鋁箔包裝中并在 1-3 天內(nèi)讀取它們，讓您在方便時(shí)讀取板，這可能有助于避免長時(shí)間在實(shí)驗(yàn)室！

探索 alamarBlue 的魅力

我們已經(jīng)描述了我們喜歡 alamarBlue 的三個(gè)主要原因，以及它如何為您的細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)增加價(jià)值。您可以在我們的專用資源頁面上找到更多原因，說明為什么它可以成為您實(shí)驗(yàn)室的重要試劑，以及使用 alamarBlue 所需的所有工具。

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References

O’Brien J et al. (2003). Investigation of the Alamar Blue (resazurin) fluorescent dye for the

assessment of mammalian cell cytotoxicity. The FEBS Journal, 267, 5421-5426.